紫外-可見分光光度計 是 在紫外可見區(qū)可任意選擇不同 l 的光測定吸光度的儀器。

一. 紫外-可見分光光度計的主要部件

 1. 光源：提供入射光的裝置；

（1）鎢燈或碘鎢燈：發(fā)射光 l 范圍寬，但紫外區(qū)很弱， 通常取此 l > 350nm 

光為可見區(qū)光源

（2）氫燈或氘燈：氣體放電發(fā)光光源，發(fā)射150~400nm的連續(xù)光譜，用作紫外區(qū)                同時配有： 穩(wěn)壓電源（穩(wěn)定 I0 ）；光強(qiáng)補(bǔ)償裝置； 聚光鏡等。

2. 單色器：將來自光源的光按波長的長短順序分散為單色光并能隨意調(diào)節(jié)所需波長光的一種裝置。

（1）色散元件——把混合光分散為單色光的元件是單色器的關(guān)鍵部分！）

常用的元件有：

    棱鏡——由玻璃或石英制成，它對不同l 的光有不同的折射率，將復(fù)合光分開

但：光譜疏密不均  長 l  區(qū)密，短 l  區(qū)疏

光柵——由拋光表面密刻許多平行條痕（槽）而制成，利用光的衍射作用和干擾作用使不同 l 的光有不同的方向，起到色散作用。（光柵色散后的光譜是均勻分布的）

（2）狹縫——入口狹縫：限制雜散光進(jìn)入  出口狹縫：使色散后所需 l 的光通過

（3）準(zhǔn)直鏡——以狹縫為焦點的聚光鏡其作用為：將來自于入口狹縫的發(fā)散光變成單色光把來自于色散元件的平行光  聚集于出口狹縫

3. 吸收池：裝被測溶液用的無色、透明、耐腐蝕的池皿光學(xué)玻璃吸收池——只能用于可見區(qū)  石英吸收池——可用于紫外及可見區(qū)。

     定量分析時：吸收池應(yīng)配套（同種溶液測定 ?A < 0.5%）

4. 檢測器：將接受到的光信號轉(zhuǎn)變成電信號的元件。

常用的有：

（1）光電管  一真空管內(nèi)裝有：

一個絲狀陽極——用鎳制成

              一個半圓筒狀陰極——金屬制成，凹面涂光敏物質(zhì)。

國產(chǎn)光電管：紫敏光電管：用銻、銫做陰極，適用范圍200~625nm

            紅敏光電管：用銀、氧化銫作陰極，適用范圍625~1000nm

（2）光電倍增管：原理與光電管相似，結(jié)構(gòu)上有差異。

5. 顯示器：電表指針、數(shù)字顯示、熒光屏顯示等

           顯示方式：A、T(%)、c 等

二. 分光光度計的類型

     常見的可見及紫外-可見：

1. 單波長、單光束（721、722、752 型等）

     一個單色器；一種波長的單色光；一束單色光。

2. 單波長雙光束

從一個單色器獲取一個波長的單色光用切光器分成二束強(qiáng)度相等的單色光實際測量到的吸光度 A 應(yīng)為 ?A ( As- AR) 

                       (14)

式中消去了I0 , 即消除了光源不穩(wěn)定性引起的 A 值測量誤差。

3. 雙波長

   二個單色器得到二個波長不同的單色光。

    兩束波長不同的單色光（l1、l2 ）交替地通過同一試樣溶液（同一吸收池）后照射到同一光電倍增管上，后得到的是溶液對 l1和 l2兩束光的吸光度差值 ?A 即Al1 -Al2 ：

圖4  雙波長雙光束以雙波長單光束方式工作時的光學(xué)系統(tǒng)圖

若用于測定渾濁樣品或背景吸收較大的樣品時，可提高測定的選擇性，用 AS 表示非待測組分的吸光度(背景吸收)則

            (15)

           (16)

    一般情況下：由于l1 與 l2 相差很小，可視為相等（As 一般不受l

的影響，或影響甚微）

     ∴           As（1） =  As（2） 

          因此，通過吸收池后的光強(qiáng)度差為

                (17)

該式表明：試樣溶液中被測組分的濃度與兩個波長l1 和 l2處的吸光度差 ?A 成比例，這是雙波長法的定量依據(jù)。 雙波長不僅可測定多組分混合試樣、渾濁試樣，而且還可測得導(dǎo)數(shù)光譜。